Microbiologist писал(а):
adam писал(а):
epid писал(а):
adam, отличная коллекция. Чуму не везде достать можно))). Но фотографиям вроде четкости не хватает.
А клостридии каким методом окрашены?
Чёткости не хватает, потому что - в данном случае -предел разрешения световой микроскопии, для микобактерий туберкулёза, к примеру,
а фотографии масштабированы, но для микобактерий хорошо видна особенность окраски по Цилю-Нильсену: ярко малиновые палочки на голубом фоне. Для иерсинии пестис( чумы) - биполярное окрашивание метиленовым синим.
Метод окраски клостридий - выявление спор (Метод окраски эндоспор по Шефферу–Фултону):
1. На фиксированный мазок нанести 5 % раствор малахитового зеленого и 3—4 раза нагреть до появления паров.
2. Промыть водой.
3. Докрасить 0,5 % сафранином в течение 30 с.
4. Промыть водой, высушить и микроскопировать.
Споры бактерий окрашиваются в зеленый цвет, вегетатив
ные клетки — в красный.
-----------------------
Т.е. оригинальный размер хорошо смотрится при непосредственном наблюдении, всё понятно, но для фотографии - размеры должны быть другими.
-------------------------
Для сравнения фото микобактерий туберкулёза( та же окраска по Цилю-Нильсену), чёткость так же отсутствует:
http://www.atmph.org/viewimage.asp?img= ... 763_f3.jpghttp://www.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/ph ... 076-11.htmИли набрать в Гугле: mycobacterium tuberculosis ziehl neelsen, все варианты фотографий.
Малахитовый зелёный - ни в коем случае не 5% раствор. В одном руководстве по микробиологии допустили опечатку, и теперь эта неправильная концентрация кочует из одного руководства в другое. На самом деле нужно использовать раствор концентрации 0,5 - 0,7%, не больше. Мы как-то тоже решили покрасить споры 5% малахитовым зелёным, и после этого всю посуду и стёкла пришлось выкинуть после воздействия этого раствора - он очень сильно въедается и загрязняет всю посуду, что потом ничем не отмывается.
Кстати, похожую биполярную окраску можно получить намного с менее опасными другими представителями рода иерсиний.
Всё же, в каталоге реактивов Merck для микробиологии -
http://178.250.165.133/ex/downloads/brochures/merck/merck_staining_de.pdf речь идёт именно о -
5% растворе малахитового зелёного, пожалуйста, страница 15 :
Malachitgrün 1.15942 C.I. 42000 90 Sporen:
(Oxalat)
5 %ige wässrige Lösung--------------------
Малахитовый зелёный( оксалат) споры - 5% водный раствор.
------------------------------------------
Страница 20 - указание на конкретный метод окраски - окраска спор по Шефферу-Фултону:
Malachitgrün (Oxalat) 1.01398 C.I. 42000 Mikrobiologie, Nährbodenzusatz
Sporenfärbung nach Schaeffer-Fulton 5 g Malachitgrün in 100 mldest. Wasser
Vitale Kernfärbung von
Pflanzenzellen:
0,001- 0,1 %ige wässrige Lösun
----------------------
Малахитовый зелёный оксалат, питательные среды, окраска спор по
Шефееру-Фултону 5г. малахитового зелёного в 100 мл. дистиллированной воды.
Витальная окраска ядер растительных клеток 0,001- 0,1 % водный раствор.
-----------
Так что, скорее всего, что-то Вы сами в окраске напутали.