Астрономия и микроскопия

Ну вот попробовал для эксперимента развести саму малость в обычной бутилированной воде,в шприце, и если приглядеться то заметны в растворе мелкие темные точки нерастворенного(свернувшегося) красителя.Вопрос: это от того что вода не дистиллированная, или оттого что РН не соответствующий?Но попробовал всё же окрасить.
Мазок крови окрасился с преобладанием синеватых тонов, эритроциты бледно серовато-синие, ядра лейкоцитов более яркие сине-фиолетового цвета.

Эритроциты должны быть бледно-розовыми или розовыми. Вероятная причина неправильной окраски - вода для разведения была не нейтральной реакции.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам

Азур-эозин вообще капризный, водой его как не разводи, все равно хлопья выпадают. Может действительно попробовать разными буферами разводить с рН 6,8 - 7,0 - 7,2. Я проще делаю, крашу неразведенным 1-2 минуты.

_________________
"Теория без практики мертва и бесплодна, а практика без теории бесполезна и пагубна» П.Л. Чебышёв.
================
Бимам Р-13. Микмед 2 вар. 11. МФН-11. КФ-4М. ОИ-30. КОН-6К. Canon 550D.
Набор объективов Leitz Wetzlar NPL Fluotar.

Так, а при окраске неразведенным есть какие-то особенности? Насколько качественно происходит окраска? Можно ли в таком случае, для экономии, просто положить на мазок фильтровальную бумагу и пропитать ее минимально необходимым количеством неразведенного красителя?
И разводят его с какой целью? Для экономии или всё же для более правильной окраски?

Попробуйте развести краситель 1:1 обычной кипячёной водой из под крана. Время окраски 40 минут. Результат, возможно будет лучше. На фильтровальную бумагу из-за опасности подсыхания лить, наверное не стоит. Налейте разведённый краситель просто на фиксированный мазок. Я сам так когда-то окрашивал, когда ещё не знал о влиянии рН, результаты были хорошими.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам

Хорошо, сегодня будем так попробовать.

Я наношу 2-3 капли неразведенного красителя и растягиваю его стеклянным шпателем или палочкой по всему мазку, не касаясь самого мазка. Через 1-2 минуты промыть и высушить.
Высыхания не бойтесь, в его составе глицерин.
С фильтровашкой получается методика окраски по Синёву, только там спиртовым р-ром пропитывается и высушивается, при необходимости накладывается на мазок и смачивается, очень удобно и быстро. Но это для обычных красителей, не для азур-эозина. Разводить водой даже 1:1, есть риск выпадения хлопьев, лучше уж попробовать разводить 10-20-30 % р-ром глицерина, он этот краситель стабилизирует.

_________________
"Теория без практики мертва и бесплодна, а практика без теории бесполезна и пагубна» П.Л. Чебышёв.
================
Бимам Р-13. Микмед 2 вар. 11. МФН-11. КФ-4М. ОИ-30. КОН-6К. Canon 550D.
Набор объективов Leitz Wetzlar NPL Fluotar.

Так, это уже интереснее. У меня есть флакон глицерина из аптеки, но какой он концентрации на нем не написано, на подвижность как растительное масло. В какой пропорции его можно смешивать с красителем?

Попробуйте глицерин развести в 5 раз, а потом на стекле смешайте с красителем в разных пропорциях, 1:1, 1:5, 1:10 и посмотрите прозрачный ли раствор получается?

_________________
"Теория без практики мертва и бесплодна, а практика без теории бесполезна и пагубна» П.Л. Чебышёв.
================
Бимам Р-13. Микмед 2 вар. 11. МФН-11. КФ-4М. ОИ-30. КОН-6К. Canon 550D.
Набор объективов Leitz Wetzlar NPL Fluotar.

Все равно частицы красителя видны.

В общем так: с глицерином-вода 1:5 и краской напополам пополам эритроциты светло-фиолетовые, ни один лейкоцит не окрасился совершенно никак, красил минут 30.
А с краской вообще без разбавления все эритроциты сильно повредились и склеились в кашу, но ни один лейкоцит также не окрасился, красил минуты 2-3.

А чем мазки фиксировали?

_________________
"Теория без практики мертва и бесплодна, а практика без теории бесполезна и пагубна» П.Л. Чебышёв.
================
Бимам Р-13. Микмед 2 вар. 11. МФН-11. КФ-4М. ОИ-30. КОН-6К. Canon 550D.
Набор объективов Leitz Wetzlar NPL Fluotar.

Так же как и в первый раз,96% этиловый спирт 30 мин.
Единственное отличие: в первый раз спирт налил и погрузил стекло горизонтально мазком вверх и иногда покачивал чашку. А в эти два раза просто налил как можно больше спирта на мазок,покрыл почти всё стекло и не прикасался 30 мин.

Странно, что-то где-то не то... скорее всего рН.
У Ромейса хорошо написано с пункта 1336 и далее.

_________________
"Теория без практики мертва и бесплодна, а практика без теории бесполезна и пагубна» П.Л. Чебышёв.
================
Бимам Р-13. Микмед 2 вар. 11. МФН-11. КФ-4М. ОИ-30. КОН-6К. Canon 550D.
Набор объективов Leitz Wetzlar NPL Fluotar.

Достаточно ли наливания спирта прямо на мазок (без погружения). Нужно ли тут перемешивание (конвекция) спирта?