Алексей Лк писал(а):
PS2. насчет калибровки по флуоресцентным стеклам (они у меня то же есть) выложу скоро текст, я нашел точную инструкцию в западной книге.
5.2. Стандарты флуоресценции
Примером стандарта является урановое стекло, обладающее сильной желто-зеленой флуоресценцией [32]. Процедура измерения состоит в следующем.
1. Включите поджиг лампы эпиосвещения (НВО 100) и ждите 20 мин, не начиная измерений.
2. Поместите кусок уранового стекла 25X50 мм и толщиной 2 мм (марки GG17 или 21, Schott, ФРГ) на столик микроскопа.
3. Погрузите масляно-иммерсионный объектив в каплю нефлуоресцирующего масла на стекле. Будьте внимательны и используйте для калибровки всегда один и тот же масляно-иммерсионный объектив. Фильтры и другие оптические детали также должны быть всегда одни и те же.
4. Используйте измерительную диафрагму диаметром 2 мм.
5. Используйте максимальные показания, когда объектив практически касается стекла.
6. Перед каждым измерением иммунофлуоресценции отрегулируйте источник питания по фотоумножителю так, чтобы все время получать с уранового стекла одни и те же показания.
Другими стандартами для измерений могут служить микрокапилляры и шарики определенного размера или объема с известной концентрацией флуорохрома [33, 34].
Кроме того, стандарты необходимы для контроля реакции флуоресцентного окрашивания. В качестве такого стандарта можно использовать препарат, окрашенный определенным образом и содержащий клетки с известным количеством окрашиваемого вещества. Примером является использование диплоидных клеток в качестве стандарта для измерения содержания ДНК.
Лейси А. (ред.). Световая микроскопия в биологии. Методы. 1992
Вход
Регистрация
FAQ
Поиск
делитесь с нами вашими интересными результатами её применения в гистологии, эмбриологии 
