r9uaaj писал(а):
Ну так сафранин как второй краситель. Почему-то от фиолетового и следа не остается, всё окрашено в красный.И обесцвечивание спиртом делал по минимуму, а всё-равно потом всё красно.
Да, сафранин разводите водой примерно до 0,25%. Если красить по Граму в модификации Хукера, то там используют раствор сафранина именно с такой концентрацией. Но окрашивает он бледнее, чем фуксин. Можете попробовать окрашивать более концентрированным раствором сафранина, сократив время окраски. У нас в России принято в качестве дополнительного красителя использовать основной фуксин. Сафранин больше встречается в американских руководствах. Но большой разницы каким красителем докрашивать нет. Можно использовать для этих целей нейтральный красный.
Обесцвечивание в спирте при окраске по Граму очень ответственный этап. Время необходимое для обесцвечивания мазка в спирте варьирует в разных методиках. Для начинающих довольно хороший результат даёт погружение мазка в 96% спирт ровно на 15 сек. (время засекаете по секундомеру) и после этого сразу же сразу хорошо промываете водой.
Даже при соблюдении всех условий бактерии грамположительные бактерии могут выглядеть как грамотрицательные, а грамотрицательные - как грамположительные.