Астрономия и микроскопия

Прошу посоветовать насчет подготовки стекол. Вот что нашел по этому вопросу. Соляной кислоты не имею. Смеси Никифорова есть флакончик, только жалко тратить. Как кипятить? Надо стекла как то фиксировать (как?), чтобы гладкие поверхности не соприкасались друг с другом и чтобы от пузырения воды стекла не перемещались по посуде? Вместо банки с притертой крышкой что-то можно другое применять, например с резиновой пробкой большую пробирку или банку с накручивающейся крышкой из под овощной консервации? Стекла имею новые разные. В том числе с лунками и со шлифованными краями тоже. Имею спирт, только такое впечатление, что он впитал в себя воду, так как потрескивает пламя при горении спиртовки. Здесь написано 2 способа, что делать со стеклами непосредственно перед использованием. Протирать или держать над огнем. Надо делать и то и то или лучше ограничиться чем то одним?

=========================================

https://zakonbase.ru/content/part/684100
ПРИКАЗ Минздрава РФ от 21.03.2003 N 109 (ред. от 29.10.2009) "О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ"

9.2. Подготовка предметных стекол

Процедура приготовления мазков начинается с подготовки предметных стекол. Необходимо использовать только новые, отмытые и обезжиренные в спирте или смеси Никифорова (96° этиловый спирт + эфир в соотношении 1:1) стекла без царапин и сколов. При повторном использовании стекла могут быть недостаточно хорошо отмыты от предыдущего материала, что может привести к получению ложноположительных результатов. Не рекомендуется использовать саморезанные стекла, которые приводят к значительным аберрациям исследуемого изображения. Стекла должны соответствовать ГОСТу.

Стекла, на которых при микроскопическом исследовании были обнаружены кислотоустойчивые микобактерии, сохраняются в лаборатории в течение 1 года, а затем подлежат обязательному уничтожению и не должны использоваться повторно.

Новые предметные стекла кипятят 15 минут в 1% растворе питьевой соды (10 г двууглекислого натрия на 1 л воды), промывают в 1% растворе соляной кислоты (к 1 л воды добавляют 10 мл концентрированной соляной кислоты), а затем в проточной воде. Протирают насухо.

Для обезжиривания вымытые и высушенные стекла помещают в герметически закрытые емкости со смесью Никифорова или с 96° этиловым спиртом. Стекла должны подвергаться обезжириванию в течение суток. Непосредственно перед приготовлением мазков стекла повторно протираются насухо.

================================================
https://www.abrisplus.ru/information/os ... iyakh-s-i/
В настоящее время российскими производителями предметные стекла, не нуждающиеся в обезжиривании, не выпускаются. Импортные стекла, не нуждающиеся в очистке и обезжиривании, имеют маркировку «pre cleaned».

Новые стекла могут использоваться без предварительной обработки, необходимо лишь обезжиривание в смеси состоящей из равных частей спирта и эфира. Ранее использованные стекла замачиваются в растворе стирального порошка или мыла с перекисью водорода, после чего, спустя сутки, промываются проточной водой, заливаются раствором стирального порошка или мыла и доводятся до кипения, по окончании процедуры промываются проточной водой с щеткой, затем высушиваются и опять же помещаются в смесь спирта и эфира.

=================================================
«pre cleaned»
https://www.directindustry.com.ru/prod/ ... 43917.html
https://www.directindustry.com.ru/prod/ ... 01041.html

=================================================

Литусов Бактериоскопические методы исследования 2015
Подготовка предметных и покровных стекол. Предметные и покровные стекла для микроскопических исследований должны быть чистыми и хорошо обезжиренными. Доказательством хорошего обезжиривания стекла является равномерное распределение капли жидкости на его поверхности. Подготовленные стекла хранят в банке с притертой пробкой в сухом виде либо в спирте или в смеси Никифорова – смеси спирта с эфиром в соотношении 1:1. Перед приготовлением препарата стекло фламбируют (прожигают в пламени спиртовки).
Новые не бывшие в употреблении стекла вначале моют в воде, затем выдерживают в смеси спирта с эфиром (1:1). Новые стекла можно также кипятить в течение 10 минут в 1% растворе натрия гидрокарбоната (соды) с последующим промыванием в дистиллированной воде.
Бывшие в употреблении стекла погружают на 1-2 часа в концентрированную серную кислоту или в смесь серной кислоты с калием двухромовокислым (хромовую смесь). После этого стекла промывают в проточной воде и кипятят в 5% растворе натрия гидрокарбоната в течение 30 минут. После ополаскивания в чистой воде их высушивают в сушильном шкафу или при комнатной температуре.

Рецензент доктор медицинских наук??? Дануна... Отвратительная писанина. Скачал, полистал и удалил нафиг. Первое подозрение на лажу возникло при фразе "история открытия микроскопа". И "клетки микроорганизмов измеряются в микрометрах". (Вроде так, по памяти пишу) Смысл понятен, но жесть как безграмотно, как школота писала. В микрометрах измеряется длина/размеры. Клетки - в штуках. А схема люминесцентного микроскопа - вобще от сатаны

П.С. Не читайте такое.

_________________
Микмед-6 вар. 74., Микмед-2 вар. 11.

Обнаружил в продаже металлические штативы для предметных стекол.
А пластиковые могут растворяться от обезжиривателя?

Нашел в продаже обезжиренные стекла. Собираюсь поискать ещё баночки с притертой крышкой.

Новые предметные стёкла нужно прокипятить в растворе соды, потом прополоскать водой и замочить в слабом растворе кислоты - соляной, серной, даже уксусная кислота вполне подойдёт или лимонная. Если всего этого не сделать, то поверхность стекла будет гидрофобной и мазок сделать не получится. Вместо смеси Никифорова для обработки поверхности стекла можно применить обычное хозяйственное мыло и после этого протереть насухо чистой хорошо выстиранной х/б тканью, результат будет нисколько не хуже. От иммерсионного масла хорошо очищать стёкла кипячением их в мыльном растворе из хозяйственного мыла. Кипятить или замачивать стёкла в стиральном порошке не рекомендуется. Импортные предметные стёкла часто уже полностью готовы для употребления и никак обрабатывать их не надо.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам

Импортные предметные стёкла часто уже полностью готовы для употребления и никак обрабатывать их не надо.- Неверно. Вытереть микрофиброй. Грибком они поросли. Не протрете -увидите нити грибка.

- а почему в литературе чаще рекомендуют обратный порядок, т.е. сначала кислота (обычно - хромовая) а потом щёлочь? Существенно, в каком порядке гасить, или вкусовщина?

_________________
Люмам Р-8 (КФ-4, ОИ-13, ОИ-14, АУ-26), Микмед-6 вар. 74, МББ-1, МС-2

Наверное, кислота нужна, чтобы удалить остатки щёлочи. Не знаю. Я обрабатывал именно в такой последовательности кипячение в соде и последующее вымачивание в кислоте. Ничего плохого со стёклами в течение нескольких лет не происходило, за исключением того, что со временем появились мелкие царапины, но это из-за того, что я постоянно кипятил их в мыльном растворе для удаления остатков иммерсионного масла. Хромовой смесью я бы вообще не стал рекомендовать пользоваться в домашних условиях, особенно начинающим, т.к. жидкость очень агрессивная.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам

https://petritest.ru/spravochnik-mikrob ... -iz-stekla
Мытье предметных и покровных стекол. Предметные и покров­ные стекла должны иметь абсолютно чистую поверхность и быть хорошо обезжиренными. Капля воды, нанесенная на обезжирен­ную поверхность стекла, растекается равномерно. Если же стекло недостаточно обезжирено, то капля распадается на мно­жество мелких капель. Предметные и покровные стекла реко­мендуется мыть и ополаскивать в резиновых перчатках, чтобы не загрязнять их жиром, находящимся на поверхности кожи.

Покровные и предметные стекла, не бывшие в употребле­нии, моют в теплой мыльной воде и после ополаскивания заливают смесью Никифорова. Если стекла, вынутые через 2–3 дня из смеси Никифорова, сохраняют следы жира, то их складывают в фарфоровую чашечку, заливают 2–5 % раство­ром гидрокарбоната натрия или едкого натра, ставят на слабый нагрев и кипятят в течение 20–30 мин после закипания. Затем стекла ополаскивают проточной водопроводной водой, опус­кают на 10–15 мин в 5–10 % раствор хлористоводородной кислоты и затем промывают проточной водой.

Предметные и покровные стекла, бывшие в употреблении и загрязненные краской и иммерсионным маслом, обрабаты­вают следующим образом:

опускают на 2 ч в концентрированную серную кислоту или хромовую смесь, затем тщательно промывают проточной водопроводной водой;
заливают стекла 5 % раствором гидрокарбоната натрия или щелочи (едкий натр или едкое кали), ставят на слабый нагрев и кипятят в течение 30–40 мин.

====================================================
http://www.innovbusiness.ru/pravo/Docum ... age_1.html
ПРОФИЛАКТИКА ПАРАЗИТАРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ.
ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА МАЛЯРИИ.
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 3.2.987-00
МЕТОДИКА
ГЛАВНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ САНИТАРНЫЙ ВРАЧ РФ
19 октября 2000 г.

6. ТЕХНИКА ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
6.1. Подготовка предметных стекол

1. Предметные стекла новые замачивают в мыльном растворе,
нагревают до 60 - 80 ЬC, но не кипятят.
2. Каждое предметное стекло протирают ветошью с обеих сторон в
этом растворе.
3. Промывают в проточной воде в течение 2 - 3 ч, периодически
перемешивая.
4. Погружают в дистиллированную воду на 30 мин.
5. Проверяется качество отмывки предметных стекол от щелочи: на
предметное стекло наносят 1 каплю фенолфталеина - появление розовой
окраски раствора свидетельствует о недостаточной отмывке от щелочи.
6. Стекла протирают чистой хлопчатобумажной тканью и помещают для
обезжиривания в смесь Никифорова (из расчета 1 мл смеси на 1 стекло),
где они могут храниться в течение длительного времени.
7. Извлеченные пинцетом из смеси Никифорова стекла протирают
хлопчатобумажной стиранной материей, заворачивают в чистую гладкую не
ворсистую (!) бумагу небольшими партиями и стерилизуют.
Стекла, многократно бывшие в употреблении, для приготовления
препаратов крови использовать не рекомендуется. При необходимости их
использования следует удалить следы иммерсионного масла простиранной
ветошью, затем отмыть каждое стекло от окрашенных препаратов крови в
теплом мыльном растворе (для этой цели удобно использовать зубную
щетку с коротко срезанной щетиной). Дальнейшая обработка - такая же,
как и новых стекол.

----------------------------------------------------------------------
| Во время манипуляций с чистыми предметными стеклами их |
| следует брать только за боковые поверхности или пинцетом.

===============================================
http://old.gsu.by/biglib/gsu/%D0%91%D0% ... %D1%8F.pdf
Министерство образования Республики Беларусь
Учреждение образования
«Гомельский государственный университет
имени Франциска Скорины»
И. И. КОНЦЕВАЯ
Микробиология:
морфология и структурная
организация бактериальной клетки
Практическое руководство
для студентов специальности 1-31 01 01-02
«Биология (научно-педагогическая деятельность)»
Чернигов
Издательство «Десна Полиграф»
2017

3 На мостик укладывают предметные стекла. Внимание! Стекла
должны быть обезжиренными и их можно держать только за ребра. При
необходимости быстро обезжирить предметное стекло можно в
результате прогревания в пламени спиртовки.

========================================

https://studfile.net/preview/6887356/
Подготовка стекол. Стекла (бывшие в употреблении и новые) замачивают в 2% растворе хозяйственного мыла или стирального порошка (20,0 г порошка растворяют в 975 мл воды и добавляют 20 мл пергидроля) в эмалированной посуде на 8—10 ч. Старый мазок удаляют ватным тампоном и кипятят стекла в этом же растворе 5—10 мин. Кипячение более 10 мин и использование алюминиевой посуды приводят к помутнению стекол. Затем стекла промывают в проточной воде, насухо вытирают и выбо­рочно проверяют полноту отмывки от щелочных добавок мою­щих средств с помощью спиртового раствора фенолфталеина (1 г/л) путем нанесения 2—3 капель на стекло (розовое окрашивание не должно появляться). Отмытые стекла помещают на 30—60 мин в смесь Никифорова (этиловый спирт 96° и диэтиловый эфир в соотношении 1:1), после чего их хранят в закрытой чистой посуде.

http://www.ximicat.com/ebook.php?file=l ... vu&page=52
Техника приготовления мазка. Мазок крови! делают на предметном стекле. Стекло должно быть! чистым и обезжиренным. Малейшие следы жира делают! невозможным нанесение крови ровным слоем. Новые! стекла промывают проточной водопроводной водой, ополаскивают дистиллированной, а затем на 2—3 дня помещают в банку со смесью Никифорова для обезжиривания.

Лабораторная
диагностика малярии и бабезиозов 2015
7. Извлеченные пинцетом из смеси Никифорова стекла протирают хлопчато-
бумажной материей, заворачивают в чистую гладкую не ворсистую бумагу не-
большими партиями, оптимально по 6 штук

==============================================================
О.В. ПРУНТОВА, О.Н. САХНО
ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ
ПО ОБЩЕЙ МИКРОБИОЛОГИИ
Владимир 2005

На пламени кратковременно обжигают предметные и по-
кровные стекла, стеклянные шпатели и палочки, фарфоровые ступки и
пестики, горлышки колб, пробирок, бутылок, а также ватные пробки при
посевах культур и разливе сред. В пламени погибают и вегетативные клет-
ки, и споры микроорганизмов.

Препараты готовят, как правило, на предметных стеклах, толщина
которых не должна превышать 1,2 - 1,4 мм. Применение более толстых
стекол не позволяет получить резкое изображение краев диафрагмы осве-
тителя в плоскости препарата. Поверхность стекла должна быть тщательно
очищена и обезжирена, чтобы капля жидкости равномерно расплывалась
по стеклу. Это достигается протиранием стекол ватой, смоченной эфиром
(после этого промывание водой не требуется), или обжиганием поверхно-
сти стекол в пламени горелки (жир при этом сгорает).

=============================================
Свищёва
https://zakon.today/gematologiya_1095/p ... 30419.html

Страница 20:
https://eximlab.ru/upload/iblock/403/%D ... 2019_1.pdf

http://art-medika.com/catalog/Lab.suppl ... -4601.html
Штатив-рамка для окраски микропрепаратов на 30 стекол 76х26мм, стальная (ОКП 965210)
http://art-medika.com/catalog/Lab.suppl ... -6345.html
Емкость стеклянная 75х65х85 мм под штатив на 30 стекол для окраски препаратов

Вы сами-то чего хотите?? Мой практический опыт показал, что обычного кипячения в содовом растворе, последующей обработкой слабым раствором кислоты и вытирание насухо вполне достаточно, стёкла получаются очень чистыми и полностью обезжиренными. Остатки иммерсионного масла обычно хорошо удаляются простым кипячением в мыльном растворе. Возможно, какие-то иммерсионные масла отмывать труднее, но качественное иммерсионное масло легко отмывается от стекла без смеси Никифорова или хромовой смеси.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам

Благодарю за информацию. Стекла надо фиксировать или они могут быть в свободном плаванье в кипящей воде?

Фиксировать никак не нужно. Со временем, естественно, на стёклах появятся мелкие царапинки. Но стекло - это дешёвый расходный материал, который не жалко выкинуть и купить новые.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам

А новые покровные стекла Вы каким то способом обрабатываете?

А как создать нужную концентрацию уксусной или лимонной кислоты в воде?

В микробиологической практике я не применял покровные стёкла. В настоящее время я использую импортные полностью готовые к употреблению покровные стёкла, правда, их поверхность гидрофобная, что не всегда желательно. Концентрация кислоты - на глаз. Процентов 5...20.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам

Благодарю за важные сведения.
А каким образом промывать 2-3 часа? В эмалированном или пластиковом дуршлаге?
Или после кипячения с содой столько долго промывать не надо?

Наверное, имеется в виду, что кладут в ёмкость и ставят под слабую струю холодной воды. Я не знаю, зачем рекомендуют такое длительное промывание. Тем более сейчас везде стоят счётчики на воду и нужно воду экономить.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам