Астрономия и микроскопия

Форум сайта "Два Стрельца"
Текущее время: 29 мар 2024, 17:35

Часовой пояс: UTC + 3 часа




Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 192 ]  На страницу Пред.  1 ... 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ... 13  След.
Автор Сообщение
СообщениеДобавлено: 15 ноя 2020, 20:34 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2014, 23:33
Сообщения: 1827
Откуда: Хабаровск - СПб
zdot писал(а):
При просмотре бактерий с иммерсией на Биолам Р-11 с конденсором КОH-3, отодвигающаяся вбок линза, должна быть в каком положении? И диафрагму надо открыть на какую величину?

Почитайте техническое описание и инструкцию по эксплуатации микроскопа Биолам. Там всё написано. Да и здесь всё это неоднократно обсуждалось.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам


Вернуться к началу
 Профиль  
 

СообщениеДобавлено: 15 ноя 2020, 20:39 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2014, 23:33
Сообщения: 1827
Откуда: Хабаровск - СПб
zdot писал(а):
Благодарю.
В одной инструкции про заключительную окраску по Граму написано, что карболовый фуксин держать 10-15 с., а в другой 1-2 минуты. Что Вы думаете по этому поводу?

Окраска дополнительным красителем в данном случае не особо влияет на результат. Длительность окрашивания можно подобрать опытным путём. Старые, просроченные красители требуют более длительной окраски. К тому же,основной фуксин здесь использовать не обязательно, его можно заменить на сафранин, нейтральный красный. Окраска фуксином Пфейффера (разбавленный фуксин Циля) длится примерно от одной до пяти минут. Ещё раз повторю, время окраски определяется качеством красителя и его концентрацией.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 16 ноя 2020, 17:44 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
Хорошо, попробую по инструкции, хотя там кое-что не понятно. Пока что слизь из носоглотки исследую. А насчет крови есть вопрос: "Если нет шпателя для растяжки мазков, то можно ли использовать обычное шлифованное под 90 градусов предметное стекло"?


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 16 ноя 2020, 18:49 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2014, 23:33
Сообщения: 1827
Откуда: Хабаровск - СПб
Я брал обычное матовое стекло (светофильтр) из комплекта ОИ-19 и всё нормально получалось. Даже обычным, нешлифованным стеклом при наличии опыта можно сделать неплохой мазок.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 16 ноя 2020, 19:10 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
Благодарю за информацию. А есть разница, куда засовывать светофильтр, в ОИ-19 или в микроскоп? В каких то случаях надо одновременно в оба места?


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 17 ноя 2020, 17:08 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2014, 23:33
Сообщения: 1827
Откуда: Хабаровск - СПб
Я не люблю матовые светофильтры. Изображение с ними хуже. Если светофильтр прозрачный, не матовый, то особой разницы нет, где его устанавливать.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 17 ноя 2020, 21:18 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
А при разведении носо-горловой слизи в физиологическом растворе можно ли перепутать осевшую соль с чем то другим после подсыхания и окраски мазка?

Правда в последний раз плюнул на большое стекло со шлифованными краями и после перемешивания тонко намазалось на предметное стекло. За счет того, что оно большое, удобно водить сверху предметным стеклом (которое намного меньше), не вдавливая вплотную к нижнему. С физразствором не мешал. А способом растягивания между двумя предметными стеклами, такое впечатление, что не очень удачно мазки получаются (делал так в прошлый раз). Сейчас буду микроскопировать.

Отмикроскопировал. Чтобы меньше повредить мазок (сейчас красил по Граму), чем лучше снимать эмирсионное масло, чтобы меньше повредить мазок? Чтобы можно было отдать специалисту, если его найду у себя в городе, для уточнения или может получиться что-то с видеосъемкой в будущем. Имею этиловый спирт и ксилол.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 18 ноя 2020, 16:16 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2014, 23:33
Сообщения: 1827
Откуда: Хабаровск - СПб
Иммерсионное масло никак нельзя удалить с мазка без повреждений последнего. Можно накрыть покровным стеклом и тогда иммерсионное масло растечётся тонким слоем между стёклами и, таким образом, получится временный препарат, который можно хранить в горизонтальном состоянии некоторое время. Ни один врач-специалист не станет ставить Вам диагноз по препарату, приготовленному лично Вами, т.к. нет гарантии, что были правильно и точно соблюдены все процедуры приготовления мазка.

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 20 ноя 2020, 04:20 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
А у кого, то есть успешный опыт окраски живых бактерий с помощью набора, куда входят:
- Нейтральный красный, 0,001% раствор
- Метиленовый голубой, 0,001% раствор
(одним или другим препаратом)
То есть, получилось ли таким образом наблюдать их живыми в движении?

А двух мегапиксельная камера на самом деле подойдет для съемки бактерий и грибов на фото и видео с микроскопа и 5 мегапиксельная не особо нужна для вывода на монитор? Задавал вопрос в "4 глаза" и получил ответ:
Камера для микроскопа имеет увеличение примерно 10 крат. Соответственно при использовании камеры и иммерсионного объектива (100x) Вы получите увеличение 1000 крат, если этого увеличения будет достаточно для данных исследований, то любая камера подойдет.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 20 ноя 2020, 23:03 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
Как регулировать pH воды для окраски по Романовскому?

В видеофильме, в создании которого принимала участие ВОЗ и другие организации "Прямая микроскопия мазков на кислотоустойчивые микобактерии" по скрининговой микроскопии выделений для поиска сильно заразных людей, которых этот метод исследования хорошо выявляет (с необходимостью дополнительной диагностики, чтобы отличить туберкулез от других грибковых инфекций и повысить вероятность выявления заболевания, так как этот способ плохо определяет не высоко заразных людей), одним из условий предотвращения ошибок является фильтрация красителя через воронку с фильтром. Фильтровальная бумага, которой промокают мокрые стекла после промывания водой, как раз и предназначена для изготовления такого фильтра?


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 20 ноя 2020, 23:26 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2014, 23:33
Сообщения: 1827
Откуда: Хабаровск - СПб
Растворы некоторых красителей при старении дают осадок, поэтому, чтобы получить более чистые препараты, краситель наносят на лист фильтровальной бумаги, положенной на стекло. Поэтому фильтровать красящий раствор перед этим не обязательно.
pH воды определяют или рН-метром или растворами индикаторов. Ещё лучше вместо воды использовать фосфатный буфер. Более подробно об этом можно почитать в книге "Микроскопическая техника. Г. И. Роскин и др. 1957"

_________________
Микмед-2, Бимам, Биолам


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 20 ноя 2020, 23:52 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
Благодарю за информацию. Нашел место в фильме, где говорится про фильтрацию
https://youtu.be/_lo7-4-wd8Q?t=1005

https://youtu.be/_lo7-4-wd8Q?t=1750

Вот что читал насчет pH при окраске по Романовскому:
Пользуются фосфатным буфером, но
рН буфера зависит от вида мазка: для мазка костного мозга - 5,8 - 6,0,
для мазка крови - 6,4 - 6,5, для выявления простейших - 6,8,
малярийного плазмодия - 7,0 - 7,2.
Из статьи с сайта srcaltufevo.ru


К 10 мл дистиллированной воды нейтральной или слабо щелочной реакции
непосредственно перед окраской препарата прибавляют 10 капель краски и
тотчас же наливают на фиксированный препарат (или погружают препарат в
стаканчик с водой). Через 1 час краску сливают, препарат промывают
водой, высушивают на воздухе и исследуют. Качество окраски зависит от
свойств воды и надо проверять ее реакцию.
Речкин А.И., Копылова Г.Е., Кравченко Г.А. Морфологические свойства бактерий и методы их выявления: Учебно-методическое пособие – Нижний Новгород: Нижегородский госуниверситет, 2015

Мне на данный момент хочется научиться диагностировать грибковые заболевания органов дыхания с окраской по Романовскому.

Думаю, что повысить свои знания по микробиологической диагностике могу, приобретя набор образцов, чтобы точно видеть, как выглядит через окуляр https://aliexpress.ru/store/group/prepa ... 38466.html
По инфекционным заболеваниям из 30 позиций вариант, возможно ещё дополнительно другой набор к этому нужен.
https://aliexpress.ru/item/4000235583773.html.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 21 ноя 2020, 07:55 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
По поводу pH воды сейчас подумал, что имею в наличии аппарат приготовления живой и мертвой воды и где-то сохранял заметку из видео, как удобно очищать электроды, так как со временем на них появилась коррозия. Только возможно дистиллированная вода не проводит ток.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 21 ноя 2020, 12:12 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
Готовят краситель по Романовскому ex tempore: 1 часть концентрированного раствора азура-эозина разводят 9 частями забуференной дистиллированной воды (pH = 7,2-7,4)
Эксфолиативный цитологический анализ в дифференциальной диагностике заболеваний лор-органов
Усовершенствованная медицинская технология
Лаборатория пульмонологии отдела клинической медицины Научно- исследовательского медицинского стоматологического института ГОУ ВПО Московского государственного медико-стоматологического университета
2006

Другие методы окраски https://www.medicum.nnov.ru/doctor/libr ... or/Aii.php


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 21 ноя 2020, 17:56 
Не в сети

Зарегистрирован: 09 апр 2017, 12:39
Сообщения: 163
Окраска по Романовскому-Гимза
Лучше применять краску фабричного изготовления. Перед самой окраской готовят рабочий раствор из расчета 1 капля краски на 1 мл дистиллированной воды нейтральной реакции (определение рН воды см. ниже).
Разведенную краску наливают в чашку, на дно которой положены кусочки предметного стекла (подставка). Мазок, фиксированный химически чистым метиловым спиртом, кладут намазанной стороной вниз на поверхность слоя краски, опирая концы препарата на кусочки стекла (подставки), и оставляют в таком положении от 30 минут до 2 часов, в зависимости от качества краски, затем промывают водой и высушивают на воздухе в вертикальном положении.
Указанный способ особенно хорош для окраски спирохет, биполяров и мазков крови.
Простой способ нейтрализации дистиллированной воды. В два химических стакана (колбы) наливают по 200 мл исследуемой воды и добавляют в каждый по 1—2 капли 1% раствора нейтральрота в дистиллированной воде (индикатор). При рН воды 5,4—5,5 (кислая реакция) получается свекловично-красная (рубиновая) окраска. Тогда в один из стаканов, тщательно размешивая, прибавляют по каплям 1% раствор углекислой соды до получения ясной разницы в окраске по сравнению с водой в другом (контрольном) стакане. Моментом нейтрализации считается появле­ние заметного оранжевого оттенка; если через 10—30 секунд цвет не изменится до первоначального —нейтрализация считается достигнутой. Нельзя добавлять соду до получения ясно оранжевого или, тем более, желтого цвета; в таких случаях вода окажется сильно щелочной. Зная, сколько капель раствора соды пошло на усреднение 200 мл исследуемой пробы, легко подсчитать, сколько надо взять капель для нейтрализации любого количества той же порции воды. Для окраски лучше применять воду с рН 6,8 – 7,0.
Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, А.А. Щербаков, Л.В.Карпунина
Методы общей бактериологии
2007
Учебно-методическое пособие по методам общей бактериологии.
Предназначено для студентов факультета по специальности «Микробиология», специализаций: «Ветеринарный врач-бактериолог», «Ветеринарный врач-ветсанэксперт».
Ульяновск, ГСХА, 2008

А если нету метанола?


Вернуться к началу
 Профиль  
 
Показать сообщения за:  Поле сортировки  
Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 192 ]  На страницу Пред.  1 ... 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ... 13  След.

Часовой пояс: UTC + 3 часа


Кто сейчас на конференции

Сейчас этот форум просматривают: masana и гости: 77


Вы не можете начинать темы
Вы не можете отвечать на сообщения
Вы не можете редактировать свои сообщения
Вы не можете удалять свои сообщения
Вы не можете добавлять вложения

Найти:
Перейти:  
Создано на основе phpBB® Forum Software © phpBB Group
Русская поддержка phpBB
Яндекс.Метрика