Duke писал(а):
Сергей_62 писал(а):
Что это?
Похоже на устройство для наблюдения выходного зрачка объектива, ранняя версия МИР-4.
alex_klepnev писал(а):
Возник такой вопрос.
Фотографирую бактерии, мазок, масляная иммерсия. Фокусировка по лайвью. Объектив апохромат 100х1.32 (но в принципе этот эффект наблюдается на всех масляных объективах), прямая проекция на матрицу.
Может быть много причин:
1. слишком толстый мазок/монтирующая среда неподходящая.
2. масло сильно просохло и полимеризовалось (оно не должно быть желтым, возьмите свежее, желательно синтетическое нелюминесцирующее).
3. неверная длина тубуса.
4. объектив дефектный.
5. фотоаппарат? В зеленом канале фото получаются более четкими всегда, т.к. количество зеленых пикселей в фильтре Байера в 2 выше, чем красных и синих. Опятьже, сейчас есть варианты RGB и CMYK матриц. К разности фокусов этого конкретного объектива 100х 1.32 отношение имеет малое, но в целом, для всех объективов, зеленое изображение всегда более четкое, это надо учитывать.
1. Мазок без покровного стекла и монтирующей среды.
2. Масло новое, прозрачное
4. Дело в том, что такая картина наблюдается на 4 иммерсионниках, вряд ли они все такие.
5. Вроде в других случаях работает хорошо.
3. Вот тут надо экспериментировать. Возможно ошибка в миллиметр и может все испортить. А еще надо сфотографировать через окуляры и посмотреть, какая-там ситуация.
amphicyon писал(а):
alex_klepnev писал(а):
Возник такой вопрос.
Фотографирую бактерии, мазок, масляная иммерсия. Фокусировка по лайвью. Объектив апохромат 100х1.32 (но в принципе этот эффект наблюдается на всех масляных объективах), прямая проекция на матрицу.
Посмотрел, что получается в цветовых каналах.
Видно, что зеленый в фокусе, красный немного вне, а синий очень сильно вне фокуса. И в результате получается каша в итоговом изображении.
Почему так получается и как с этим бороться.
Именно вне фокуса, или размеры объектов в разных каналах отличаются? Если отличаются, так это ХРУ обычное. Сам недавно пробовал метод исправления масштабированием каналов, но хорошо работает только в центральной области. Причем размеры разных каналов еще и в разную сторону идут относительно базового зеленого (навскидку почти одинаково, надо присматриваться, переключая попеременно каналы в фотошопе, на бактериях видно будет хорошо). Вне фокуса, возможно, только кажется (если это апо), разность увеличения тоже так проявляется.
Короче говоря, нужна оптическая коррекция.
Именно вне фокуса. Я делал стекинг и на массиве фотографий видно, что разные каналы оказываются сфокусированы в разных положениях по высоте.
Ну ХРУ на это еще само накладывается, но это уже другой вопрос.
Действительно последую Вашему совету и попробую отснять в диапазоне расстояний до матрицы. Может что и получится.