Solar писал(а):
Да, я встречал сведения о том, что генциановый фиолетовый устойчив в спиртовом растворе (как и большинство других красителей). Но сделал в 5% карболовой кислоте, потому что так прописано в методе окраски бактерий по Граму. Тем более, что окраска по Граму может дать недостоверный результат и зависит также от возраста культуры и многого другого. Поэтому решил в точности придерживаться прописи. Буду признателен за совет, как приготовить устойчивый и долго хранящийся раствор, который можно использовать для определения Грам+/-. Кстати, как делают готовые растворы, которые закупают мед. лаборатории?
Еще возник вопрос про анатомическую окраску растений по методу Этцольда. Почитал книгу - Справочник по ботанической микротехнике. Основы и методы. Барыкина Р.П. и др. 2004. И где-то на форуме об этом методе писал Aktis. Так как не могу сделать мизерные навески красителей, то поступил следующим образом. Развел 1 г фуксина основного в 100 мл уксусной кислоты 2% - взял 1 мл этого раствора в другую баночку. Также 1 г сафранина в 100 мл уксуса 2% - взял 4 мл. Затем анилинового синего водорастворимого (он же водный синий) - 10 мл раствора. Добавил 85 мл уксусной кислоты 2% в баночку с тремя красителями и получил 100 мл краски Этцольда. И... профильтровал... Да так профильтровал, что весь анилиновый синий отфильтровался...
Вобщем из раствора вишневого цвета получил розовый фильтрат - этот самый синий напроч исчез. Вот и как сделать краску Этцольда
Фильтровал через "черную ленту" не обеззоленную. Кстати, делал отдельный водный раствор анилинового синего - нормально профильтровался, почти без осадка на фильтре.
Вариантов окрасок по Граму - тьма-тьмущая в их самых разнообразных вариациях, смотрите по справочникам.
Анилиновый синий - никак не относится к фталоцианиновым красителям, и Вы, естественно получили не краску Этцольда, а не пойми что, и сразу на помойку. Лучше вообще и полностью избегать подобных коктейлей, красители очень любят взаимодействовать между собой и выпадать в осадок.
Примеры ботанических окрасок:
Код:
Beispiele für botanische Färbungen
Einfachfärbung:
mit Methylenblau, Karmin oder Toluidinblau
Zweifachfärbung:
Anilinblau-Fuchsin, Astrablau-Safranin, Hämatoxylin
-
Chrysoidin
Dreifachfärbung:
Wacker-Färbung (Acridinrot, Acriflavin, Astrablau)
Dujardin
-
Färbung (Astrablau, Acridinrot, Chrysoidin)
Dujardin
-
Färbung (Astrablau, Acridinrot, Chrysoidin)
Simultanfärbung:
Etzold‘s Farbgemisch (FCA = Fuchsin, Chrysoidin,
Astrablau)
-
http://www.mikroskopie-bonn.de/_downloads/Einfache_Simultanfaerbung.pdfПростая окраска с
метиленовым синим, кармином или толуидиновым синим.
Двойная окраска :
анилиновый синий-фуксин, астраблау( фталоцианиновый краситель, похож на альциановый синий) - сафранин, гематоксилин -хризоидин.
Тройная окраска:
по Вакеру(акридиновый красный, акрифлавин, астраблау)
по Дюжардану(астраблау, хризоидин, акридиновый красный).
Синхронная окраска:
Смесь Этцольда((FCA =фуксин, хризоидин, астраблау.)
------------------------------
Конкретные прописи самих красителей и протоколов окраски( только вот, переводите сами, слишком много букв.
):
Fuchsin-Chrysoidin-Astrablau nach Etzold (FCA-Färbung)Astrablau-Auramin-SafraninБотаническая окраска конкретно с анилиновым синим и фуксином:
Fuchsin-Anilinblau nach EckertСайт ботаническая микротехника, с примером окраски сафранин-астраблау- хризоидин:
Eine schöne Dreifachfärbung mit Safranin-Astrablau-Chrysoidin (SAC-Färbung)