Астрономия и микроскопия
http://forum.shvedun.ru/

Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение
http://forum.shvedun.ru/viewtopic.php?f=6&t=1581
Страница 1 из 47

Автор:  Сэм-59 [ 11 янв 2013, 21:17 ]
Заголовок сообщения:  Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Поскольку в различных темах поднимаются вопросы окраски препаратов и изготовления постоянных препаратов, предлагается выделить все это в отдельную тему.

Автор:  _Л_Ё_Х_А_ [ 11 янв 2013, 21:38 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

А зачем две одинаковых темы или случайно создалась?

Автор:  Сэм-59 [ 11 янв 2013, 22:13 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Да, сам не понимаю, как. Уже попросил медератора удалить лишнюю

Автор:  Юрий_Тк [ 11 янв 2013, 22:56 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Может, кто поделится своим опытом создания постоянных препаратов. Хотя бы мазков с бактериями.

Автор:  Юрий [ 11 янв 2013, 23:12 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

http://labx.narod.ru/documents/research ... tions.html

Автор:  _Л_Ё_Х_А_ [ 12 янв 2013, 01:23 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Где можно почитать разные методы окраски растительных тканей какие красители применять ....или может опишет кто

Автор:  Юрий [ 12 янв 2013, 01:32 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

_Л_Ё_Х_А_ писал(а):
Где можно почитать разные методы окраски растительных тканей какие красители применять ....или может опишет кто


Абрамова Л.И., Орлова И.Н., Вишнякова М.А., Константинова Л.Н., Орел Л.И., Огородникова В.Ф., под редакцией д.б.н. Орел Л.И. Цитологическая и цитоэмбриологическая техника (для исследования культурных растений), Методические указания, , Ленинград, 1982

https://yadi.sk/d/PmfbOVt74CPbw

Автор:  _Л_Ё_Х_А_ [ 12 янв 2013, 02:14 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Спасибо! может ешё похожую литературу подскажите :)

Автор:  romka66rus [ 12 янв 2013, 08:20 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Как увидеть ядро у клеток лука? Без окраски их не видно.

Вложения:
0014-014-Kletki-kozhitsy-luka-pod-mikroskopom.jpg
0014-014-Kletki-kozhitsy-luka-pod-mikroskopom.jpg [ 52.21 КБ | Просмотров: 23692 ]

Автор:  Юрий [ 12 янв 2013, 08:56 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

romka66rus писал(а):
Как увидеть ядро у клеток лука? Без окраски их не видно.

слабым раствором йода.10-12 капель раствора йода на 5 мл воды.

Автор:  Сэм-59 [ 13 июл 2013, 12:25 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Мои первые опыты по комбинированной окраске с теми красителями, что удалось добыть.
Поперечный срез виноградной лозы (побег этого года, диаметр побега ок. 5 мм).
Фиксация: аптечный препарат формидрон + ледяная уксусная к-та (7 мл кислоты на 100 мл формидрона).
Промывка: 50% этиловый спирт, 30% этиловый спирт, дист. вода.
Окраска:
Раствор № 1: аптечный препарат фукарцин (содержит карболовый фуксин), 1% р-р сафронина, 1% р-р хризоидина (1:1:1), 2% уксусная к-та. Окрашивание с визуальным контролем под микроскопом до приобретения срезом красно-малинового цвета средней интенсивности (5 - 10 минут). Промывка в дистиллированной воде до видимого прекращения отхождения красителя.
Раствор № 2: 1% р-р анилинового голубого водорастворимого, 2% уксусная к-та. Окрашивание с визуальным контролем под микроскопом до появления цветового контраста в срезе (около минуты). Промывка в дистиллированной воде.
Срез просветлен в глицерине (при этом отходит некоторое количество анилинового голубого, цветовой контраст падает) и помещен под покровное стекло в каплю глицерина, чтобы не высыхал.
Объектив ЛОМО План 9х, редуктор фокуса - объектив Т43 от ф/а Смена 8, 2 МП вэб-камера.
К сожалению, срез целиком не входит в поле зрения даже объектива План 3,5х, и к тому же с этим объективом не удается осветить все поле зрения. Поэтому на фото только фрагменты.
Отдельное спасибо Актису за консультации и книгу по ботанической микротехнике.

Вложения:
Комментарий к файлу: Наружная часть среза
Виноградная лоза-2.jpg
Виноградная лоза-2.jpg [ 144.95 КБ | Просмотров: 23149 ]
Комментарий к файлу: Ксилема и сердцевина.
Виноградная лоза-3.jpg
Виноградная лоза-3.jpg [ 157.32 КБ | Просмотров: 23149 ]

Автор:  Сэм-59 [ 13 июл 2013, 14:19 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

А этот снимок в скрещенных поляроидах с компенсатором лямбда. Объектив 20х.

Вложения:
Виноградная лоза-4.jpg
Виноградная лоза-4.jpg [ 150.61 КБ | Просмотров: 23144 ]

Автор:  Дмитр [ 14 июл 2013, 03:48 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Может есть смысл сделать набор наиболее востребованных красителей в качестве отдельного изделия, или такие уже существуют в продаже? Или это и есть особый вид творчества, который невозможно формализовать.

Автор:  Сэм-59 [ 14 июл 2013, 12:26 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Дмитр писал(а):
Может есть смысл сделать набор наиболее востребованных красителей в качестве отдельного изделия, или такие уже существуют в продаже? Или это и есть особый вид творчества, который невозможно формализовать.

У многих производителей школьных и даже игрушечных микроскопов есть наборы для окрашивания, обычно для окрашивания бактерий по Граму (генцианвиолет, основной фуксин и р-р Люголя). А вообще - окрашивание это способ выявления тех или иных элементов структуры или веществ внутри клетки. В зависимости от метода и целей наблюдения используются разные красители, их огромное количество, а методик окрашивания еще больше. Посмотрите ветку Актиса viewtopic.php?f=6&t=1584, он эксперт по окрашиванию в ботанике. Юрий профессиональный гистолог, он эксперт по окрашиванию в своей сфере. Они могли бы сформулировать список красителей, который можно рекомендовать для такого "любительского набора". Но такой набор будет иметь смысл одновременно с методическим руководством по приготовлению препаратов, по образцу такого: "Эксперимент по физиологии растений в средней школе" (см. viewtopic.php?f=6&t=1351)

Есть еще один момент. Окраска требует наличия чего-то вроде мини-лаборатории и желания тратить время на все эти процедуры. Часто любители предпочитают обзавестись устройствами контрастирования (темное поле, фазовый контраст) и сосредоточиться на бактериях и простейших - результат гарантированный и получается гораздо скорее. С технологией изготовления окрашенных препаратов многие не захотят заводиться.

Что же касается моих опытов, то их цель - получить просто красивый препарат для собственного удовольствия, как Вы точно заметили, "особый вид творчества". Чем бы дитя не тешилось...

Автор:  Melarsoprol [ 14 июл 2013, 12:36 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

красители это лишь часть дела, нужны приборы для изготовления срезов ,термостаты, реактивы и многое-многое другое ,все это очень недешево, и зачастую гораздо дороже самого микроскопа

Страница 1 из 47 Часовой пояс: UTC + 3 часа
Powered by phpBB® Forum Software © phpBB Group
https://www.phpbb.com/