Астрономия и микроскопия
http://forum.shvedun.ru/

Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение
http://forum.shvedun.ru/viewtopic.php?f=6&t=1581
Страница 41 из 51

Автор:  lecter [ 02 янв 2018, 02:52 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Как говорил один из анатомов "яйца - это у страуса, а у мужчин все-таки яички" :)

Автор:  Solar [ 13 янв 2018, 13:19 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Кто знает, подскажите. Где взять бактерий, чтобы заведомо одновременно были грамположительные и грамотрицательные в одном образце? Что бы такое доступное взять, типо прокисшего борща, рассола от огурцов или еще чего попробовать? Главное знать, что и те, и другие есть. А то красил по Граму бактерий из воды с землей, но что-то не получилось. То-ли там все грамотрицательные оказались, то-ли неправильно красил. Да еще и красители сам готовил из сухих - может в этом дело. Короче говоря, хочу попробовать на каких-нибудь "образцовых" микробах.

Автор:  lecter [ 14 янв 2018, 00:24 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Либо налет с зубов, или, лучше из десневых карманов, либо кал. С гарантией и Гр+ и Гр- бактерии будут.
Прокисшие продукты - как правило 1-2 вида бактерий, разнообразия не будет.

Автор:  Solar [ 14 янв 2018, 05:10 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Спасибо. Этого добра в хозяйстве навалом :mrgreen: Надо будет попробовать. Правда тут еще одна засада. Приготовленный летом генциановый фиолетовый (1% на карболовой кислоте 5%) - выпал в осадок, зараза такая :) Наверное, теперь буду сушить бумажки по Синеву. Или куплю продажный раствор. Кстати, как его делают со сроком годности 1 год?

Автор:  lecter [ 14 янв 2018, 11:59 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Делайте бумажки, для окраски по Граму лучший вариант. В слабых растворах красители непредсказуемы, могут простоять 10 лет без порчи, могут через месяц обесцветиться или в осадок выпасть. Для того, чтобы генцианвиолет не выпадал нужна вода дистиллированная, а то и дважды, рН определенный, изолировать от кислорода, так что если хотите его и фуксин в жидком виде иметь, то лучше в виде маточных растворов хранить 10-20 кратных спирто-фенольных и при надобности разводить понемногу.
ПыСы. Вспомнил, на микробиологии для обучения этой окраске нам выдавали смесь культур стафилококка и кишечной палочки. Соответственно, если все правильно сделал, то в препарате все палочки красные, кокки - синие.

Автор:  Solar [ 14 янв 2018, 15:03 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Нее... Лишь бы не было худого. Лучше потренеруюсь на зубах :)

Автор:  Евгений251082 [ 15 янв 2018, 14:14 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Коллеги, спрошу здесь. Подскажите пожалуйста. Нефлуоресцирующее иммерсионное масло по химическому составу чем отличается от обычного иммерсионного?
Надо будет приобрести (возьму у себя в проверенной медтехнике) и возник вопрос, это самое нефлуоресцирующее масло можно без опаски применять с обычными МИ объективами? В плане с объективами не для флюоресценции, а обычными МИ? То есть, не содержит ли это масло каких-то особых химических примесей?

Автор:  adam [ 15 янв 2018, 16:04 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Евгений251082 писал(а):
Коллеги, спрошу здесь. Подскажите пожалуйста. Нефлуоресцирующее иммерсионное масло по химическому составу чем отличается от обычного иммерсионного?
Надо будет приобрести (возьму у себя в проверенной медтехнике) и возник вопрос, это самое нефлуоресцирующее масло можно без опаски применять с обычными МИ объективами? В плане с объективами не для флюоресценции, а обычными МИ? То есть, не содержит ли это масло каких-то особых химических примесей?

Евгений, нефлуоресцирующее иммерсионное масло имеет синтетический состав( какой, посмотрите сами в сети, в разделе патентов указываются очень подробные характеристики), напротив, обычное иммерсионное масло - разные фракции масла Juniperus, почему это масло называют кедровым маслом, а не маслом можжевельника, Juniperus - он и в Африке юниперусом будет :D , не знаю? Так вот, большинство природных компонентов, канадский бальзам в особенности, дают очень хорошую флуоресценцию, как итог - засветка всего и вся. Отсюда, применение синтетических аналогов монтирующих сред и масел для люминесценции в микроскопии. Для объективов, в плане безопасности ещё и лучше.
Пример одного из патентов:
Способ получения иммерсионного масла

Автор:  Microbiologist [ 15 янв 2018, 16:26 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Для люминесценции нужно специальное нефлюоресцирующее иммерсионное масло, обычное иммерсионное масло не подойдёт. Нефлюоресцирующее масло можно использовать и для обычной масляной иммерсии, но оно гораздо дороже обычного иммерсионого масла. Здесь важно не купить подделку. Нередко за нефлюоресцирующее иммерсионное масло выдают обычное копеечное вазелиновое масло.

Автор:  Евгений251082 [ 15 янв 2018, 21:08 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Спасибо) нет, мне не для флюоресценции). Хорошо, конкретно, это нефлюоресцирующее масло подходят для ОБЫЧНЫХ (!) объективов МИ?

adam, Microbiologist, спасибо!

Автор:  wadimko97 [ 22 янв 2018, 07:10 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Извиняюсь за может глупый вопрос.
А чем потом постоянные препараты отмывать от иммерсионного масла?

Автор:  Solar [ 22 янв 2018, 09:38 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Спиртом или петролейным эфиром.

Автор:  Евгений251082 [ 22 янв 2018, 14:46 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

wadimko97 писал(а):
Извиняюсь за может глупый вопрос.
А чем потом постоянные препараты отмывать от иммерсионного масла?


Очищают постоянные микропрепараты от свежего иммерсионного масла - бензином (очищенным, к примеру тем что для зажигалок). Это наиболее безопасный для препаратов способ, в отличие от того же спирта, который денатурирует канадский бальзам (если препараты с ним).

Если следы масла застарелые - лучший способ - ксилолом или толуолом аккуратно с салфеткой бумажной убираем масло. Этот способ так же совершенно безвреден для постоянных препаратов, разумеется если аккуратно это делать.

Автор:  Rasalam [ 05 мар 2018, 14:42 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Коллеги, подскажите, в какую монтирующую среду лучше всего заключать мазки крови (окраска по Романовскому) в качестве постоянных препаратов? Бальзам отпадает, т.к. в нем мазки обесцвечиваются. Рассматривается полистирол, поливиниловый спирт, какая-либо эпоксидная смола.
У кого есть опыт в этом вопросе?

Автор:  lecter [ 05 мар 2018, 15:01 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

В полистирол заключайте, остальное не подходит, поливиниловый спирт на водной основе, эпоксидки тоже могут обесцвечивать красители, пока не затвердеют. Правда, читал, что существует сорт бальзама (нейтрализованный), который подходит для заключения мазков, но нигде не видел. Ну может еще какая экзотика, типа среды Эльяшева или другие синтетические смолы.

Страница 41 из 51 Часовой пояс: UTC + 3 часа
Powered by phpBB® Forum Software © phpBB Group
https://www.phpbb.com/