Астрономия и микроскопия
http://forum.shvedun.ru/

Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение
http://forum.shvedun.ru/viewtopic.php?f=6&t=1581
Страница 40 из 47

Автор:  lecter [ 04 май 2017, 23:29 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Решил собрать коллекцию микропрепаратов, чтобы всё своими руками, так сказать, от начала до конца.
Вот, пока болел, на почке потренировался, порезал-наклеил-покрасил-заключил. Что-то не очень :?
Красил гематоксилином Вейгерта, ядра выглядят отлично. Для фона эозин К взял, оттенок не нравится, какой-то сероватый. Может подскажете, кто каким эозином или чем другим пользовался?
Изображение

Изображение

Автор:  Юрий [ 04 май 2017, 23:38 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

lecter писал(а):
Решил собрать коллекцию микропрепаратов, чтобы всё своими руками, так сказать, от начала до конца.
Вот, пока болел, на почке потренировался, порезал-наклеил-покрасил-заключил. Что-то не очень :?
Красил гематоксилином Вейгерта, ядра выглядят отлично. Для фона эозин К взял, оттенок не нравится, какой-то сероватый. Может подскажете, кто каким эозином или чем другим пользовался?

Материал свежий? Гематоксилин фильтровали? И чем фиксировали?
мне кажется материал не свежий......

Автор:  lecter [ 05 май 2017, 00:10 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

От упокоения до забора около суток, тяжело больной (Cr), видимо с длительной агонией, фиксировался 10% формалином, внешне - свежачок. Хотя по картинке почка умирать еще при жизни начала. Действительно, может тинкториальные свойства ткани так изменились?
А вот гематоксилин не профильтровал...

Автор:  Юрий [ 05 май 2017, 00:21 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

lecter писал(а):
От упокоения до забора около суток, тяжело больной (Cr), видимо с длительной агонией, фиксировался 10% формалином, внешне - свежачок. Хотя по картинке почка умирать еще при жизни начала. Действительно, может тинкториальные свойства ткани так изменились?
А вот гематоксилин не профильтровал...

может снимок такой но ядрышки гиперхромные я так и подумал что (C-r), не лучший объект для окраски . Помню первый раз резал лейкозную инфильтрацию селезёнки..... это был тихий ужас все сыпалось и отваливалось...

Автор:  lecter [ 05 май 2017, 00:28 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Снимок не очень получился, глазом лучше. Почка-то здесь не задействована, C-r я у него с легкого нарезал, завтра попробую.

Автор:  lecter [ 08 май 2017, 19:07 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Еще немножко препаратов.
Поиграл с режимами окрашивания, проводки, стало лучше, хотя еще далеко не идеал.
Изображение
рак 40х
Изображение
печень 40х
Изображение
печень 64х
Изображение
рак 40х
Изображение
рак 64х
Изображение
головной мозг 64х

Автор:  alex_klepnev [ 02 июл 2017, 21:15 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Простой и довольно дешевый заменитель термостата. И компактный.
Воскоплав для растапливания парафина.
Предварительно надо только проградуировать ручку температуры.
Изображение

Автор:  lecter [ 05 июл 2017, 17:54 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Я немного другим путем пошел, взял китайский холодильник на элементе Пелтье (может и как печка работать), приделал к нему китайское-же реле, и получил вполне нормальный термостат.

Изображение

Изображение

Автор:  Asmodei67 [ 05 июл 2017, 19:13 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Игорь элементы пельтье тянут?
На сколько ват холодильник? ----РАЗГЛЯДЕЛ НА ФОТО.
Я думал о коврике для 3D принтеров.

Автор:  lecter [ 05 июл 2017, 19:33 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Элемент TEC-1 12706 57.2 Вт 15.2 В
Теоретически в режиме охлаждения должен создавать разность температур в 20 градусов с забортной, реально ниже +8 не охлаждает. В режиме нагрева максимально +70.

Автор:  lecter [ 17 сен 2017, 03:02 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Доброго времени суток, коллеги. Очередной вопрос. Как размягчить хитин для резки. Удалось поймать экземпляр дозорщика-императора, красавец, пока плавает в карнуа в моей модификации. Есть-ли у кого практический опыт? Литературные данные не нужны. Диафанол могу получить. Что-то кроме него?

Автор:  Solar [ 09 ноя 2017, 15:29 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Апнул вопрос. Мне тоже интересно в перспективе :)

Автор:  Borghe [ 23 ноя 2017, 09:43 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Здравствуйте, подскажите пожалуйста где достать монтируюшую среду с высоким показателем преломления для диатомовых водорослей, или как ее можно изготовить.

Автор:  Rasalam [ 23 ноя 2017, 10:16 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Borghe писал(а):
Здравствуйте, подскажите пожалуйста где достать монтируюшую среду с высоким показателем преломления для диатомовых водорослей, или как ее можно изготовить.

viewtopic.php?f=6&t=1581&p=60617&hilit=%D0%B0%D0%BD%D0%B8%D0%BB%D0%B8%D0%BD#p60617

Автор:  adam [ 01 янв 2018, 18:07 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Всех с наступившим Новым Годом :D , и всем новых открытий в бескрайнем микрокосмосе, чего там только нет!
Вот дорогие мои, в данной ветке - предлагаю вашему вниманию следующее: попались мне советские микропрепараты в количестве 100 штук, неплохие, растительные срезы замечательные, что-то в них выцвело, но в поляризации - самое то, в общем без нареканий. А вот гистологические срезы, самые разные и очень интересные( вымя коровы, миокард лошади, зелёная железа рака и так далее) - все в окраске замечательные, но с одним очень существенным изъяном: все они скукоженные и гофрированные, волнистые, так что -ни одного ровного поля нет, постоянно приходилось крутить микровинт. Просмотрел я их внимательно на просвет, и оказалось, что всё это -целлоидиновые срезы. Мои догадки подтвердились, из форума гистологов:
Цитата:
Много лет работали на целлоидине. В то время я не уделял внимания лаборантской работе и всех тонкостей самой проводки не изучил.
НО! Срезы получались бесподобные: толщина порядка 15-20 мкм, в фокусе в поле зрения в микроскопе не более 15% среза, постоянно крутишь микровинт для просмотра всего поля зрения, детали хроматина это нонсенс и т.д и т.п.
-http://ihc.ucoz.ru/forum/30-218-1
Цитата:
Меня разбирает жуткое любопытство. С одной стороны, коллекционные учебные гистологические препараты обычно делали именно с залитого в целлоидин материала. Качество срезов - превосходное. Классики гистологии, Максимов-Заварзин-Щелкунов - тоже работали чаще всего именно с целлоидиновыми срезами.
-http://ihc.ucoz.ru/forum/30-218-1
Знающие люди, гистологи, поправьте меня - что может быть бесподобного в скукоженных срезах :D , вот уж не знаю? Если микровинт приходится крутить постоянно туда-сюда, парафиновые срезы, напротив, обычно плоские в доску по всем полям зрения. Кто-нибудь работает ли ещё с целлоидином?
--------------------------------
Но, есть способ борьбы за ровное поле: просматривая англоязычный видеоролик изготовления целлоидинового среза кости, я обратил внимание, что на готовый срез кладётся груз, размером чуть ли не с кирпич.
Мой метод: препарат, со стороны предметного стекла( не покровного!!) просто подогревается над любой лампой накаливания до появления приятного хвойного запаха( оказывается, 30, 40 -летний канадский бальзам способен всё ещё отлично плавиться!). И тут же на покровное стекло кладётся груз( гири из набора для весов) весом не менее 100 грамм, а то и более, причём, в начале кладётся маленькая гиря, по размерам не больше покровного стекла, во избежании склеивания гири со стеклом( препарат на помойку), и уже на эту гири кладётся другой груз.
Результат: процесс пошёл, как говаривал Михаил Сергеевич Горбачёв :D, не полностью, но всё же удалось получить хотя бы отдельные плоские фрагменты в препарате. Удалось исправить препарат семенников( мужских яиц) :D , кстати, один из немногих гистологических препаратов на котором отчётливо виден мейоз, сперматогенез по слоям также виден отлично!
На подходе - гистогенез сердца зародыша свиньи.

Страница 40 из 47 Часовой пояс: UTC + 3 часа
Powered by phpBB® Forum Software © phpBB Group
https://www.phpbb.com/