Астрономия и микроскопия
http://forum.shvedun.ru/

Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение
http://forum.shvedun.ru/viewtopic.php?f=6&t=1581
Страница 18 из 47

Автор:  Юрий [ 16 авг 2014, 20:23 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

guddini писал(а):
Кто знает, зачем в состав красителя добавляют глицерин?

если речь идет о гематоксилине то последний в глицерине более стабилен и дает более интенсивную окраску.

Автор:  guddini [ 16 авг 2014, 23:23 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Юрий писал(а):
guddini писал(а):
Кто знает, зачем в состав красителя добавляют глицерин?

если речь идет о гематоксилине то последний в глицерине более стабилен и дает более интенсивную окраску.

Спасибо.
А есть какие нибудь правила, как правильно просматривать мазок?

Автор:  Юрий [ 17 авг 2014, 20:13 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

guddini писал(а):
Юрий писал(а):
guddini писал(а):
Кто знает, зачем в состав красителя добавляют глицерин?

если речь идет о гематоксилине то последний в глицерине более стабилен и дает более интенсивную окраску.

Спасибо.
А есть какие нибудь правила, как правильно просматривать мазок?

Ну общие правила для исследования любых перпаратов, начинают с малого увеличения и далее смотрят по полям, интересуемое поле просматривают под бo'льшим увеличением.
мазки исследуют( кровь) по ломаной траектории.

Автор:  guddini [ 19 авг 2014, 20:08 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Мазок крови допустимо фиксировать в ацетоне, или не надА?

Автор:  Юрий [ 19 авг 2014, 21:16 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

guddini писал(а):
Мазок крови допустимо фиксировать в ацетоне, или не надА?

фиксация возможна. раньше ацетон был очень популярен для фиксации нервной ткани.
Условие одно он должен быть обезвоженный. насчет мазков- я нигде ни читал, что фиксируют в ацетоне мазки.
пробуйте

Автор:  guddini [ 19 авг 2014, 21:31 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Где-то в учебнике по гистологии вычитал. Там написано так:
Кроме метилового спирта, пользуются и другими фиксаторами: абсолютным этиловым спиртом (20—30 минут), чистым ацетоном (5 минут), смесью, спирта с эфиром в равных пропорциях (10—20 минут), 1% раствором осмиевой кислоты (V3—1 час).
По этому и спрашиваю...

Автор:  Юрий [ 19 авг 2014, 21:36 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

guddini писал(а):
Где-то в учебнике по гистологии вычитал. Там написано так:
Кроме метилового спирта, пользуются и другими фиксаторами: абсолютным этиловым спиртом (20—30 минут), чистым ацетоном (5 минут), смесью, спирта с эфиром в равных пропорциях (10—20 минут), 1% раствором осмиевой кислоты (V3—1 час).


в учебниках 50-60 годов да там есть упоминания, но опять же вы нигде не купите просто чистый ацетон( это прекурсор)

Автор:  guddini [ 19 авг 2014, 21:38 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Юрий писал(а):
в учебниках 50-60 годов да там есть упоминания, но опять же вы нигде не купите просто чистый ацетон( это прекурсор)

Так ацетон очень легко абсолютизировать в домашних условиях негашеной известью.
Можно абсолютировать йодированной солью прокаленной на сковородке.

Автор:  Юрий [ 19 авг 2014, 22:47 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

guddini писал(а):
Юрий писал(а):
в учебниках 50-60 годов да там есть упоминания, но опять же вы нигде не купите просто чистый ацетон( это прекурсор)

Так ацетон очень легко абсолютизировать в домашних условиях негашеной известью.
Можно абсолютировать йодированной солью прокаленной на сковородке.

к сожалению ни один ни второй способ не очищает тех ацетон.

Автор:  guddini [ 19 авг 2014, 22:51 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Юрий писал(а):
guddini писал(а):
Юрий писал(а):
в учебниках 50-60 годов да там есть упоминания, но опять же вы нигде не купите просто чистый ацетон( это прекурсор)

Так ацетон очень легко абсолютизировать в домашних условиях негашеной известью.
Можно абсолютировать йодированной солью прокаленной на сковородке.

к сожалению ни один ни второй способ не очищает тех ацетон.

Понял. Тогда будем продолжать фиксировать спиртом, которого у меня просто "залейся")))

Автор:  Юрий [ 19 авг 2014, 22:53 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

guddini писал(а):
Юрий писал(а):
в учебниках 50-60 годов да там есть упоминания, но опять же вы нигде не купите просто чистый ацетон( это прекурсор)

Так ацетон очень легко абсолютизировать в домашних условиях негашеной известью.
Можно абсолютировать йодированной солью прокаленной на сковородке.


Абсолютный ацетон. Технический ацетон содержит примесь воды, метилового спирта и уксусной кислоты.

Абсолютирование ацетона. Один литр технического ацетона смешивают с водой в соотношении 3 : 1 и перегоняют (на водяной бане с электрообогревом) из круглодонной колбы на 2 л с дефлегматором высотой 25—30 см, собирая фракцию, которая переходит до 70°. Эту фракцию помещают в колбу, снабженную хорошо действующим обратным холодильником, добавляют растертый в порошок перманганат калия из расчета 4—5 г на 1 л ацетона и кипятят на водяной бане в продолжении 4—5 час. до обесцвечивания раствора. Затем добавляют еще половинное количество перманганата калия и после часового кипячения, если раствор не обесцветится, заменяют обратный холодильник на нисходящий и отгоняют ацетон.

Полученный таким путем ацетон не содержит уже метилового спирта, но содержит воду. Для высушивания его помещают в колбу, снабженную обратным холодильником, закрытым хлоркальциевой трубкой, прибавляют безводного хлористого кальция (120 г хлористого кальция на 1 л ацетона) и кипятят, дважды заменяя осушитель через каждые 5—6 час. Переливание ацетона (после охлаждения) на свежий осушитель следует производить возможно быстрее, так как ацетон энергично поглощает влагу воздуха.

После этого заменяют обратный холодильник на нисходящий, к которому при помощи алонжа, имеющего отвод, соединенный с хлоркальциевой трубкой, присоединяют склянку-приемник из коричневого стекла, охлаждаемый льдом, и перегоняют ацетон над хлористым кальцием.

Высушивание ацетона является наиболее ответственной операцией, так как он сильно поглощает и прочно удерживает влагу. Между тем наличие в ацетоне даже незначительных количеств влаги вызывает резкое снижение выхода (на 20—30%) продуктов реакции, получаемых, например, взаимодействием ацетона с магнийорганическими соединениями.

Для высушивания ацетона можно рекомендовать также обезвоженный поташ или сульфат магния.

Автор:  Сэм-59 [ 22 авг 2014, 01:06 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Когда-то спрашивал про то, как бороться со сворачиванием парафинового среза в трубочку при резке. В дополнение к взятым на вооружение советам охладить парафиновый блок и пластифицировать парафин диметилсульфоксидом приспособился резать так, чтобы левой рукой придерживать край среза иглой; помогает; срез волнисто ложится на смоченное водой лезвие (опасная бритва) и легко сходит с него в теплую воду.

На фото - устьице листа алоэ древовидного, срез толщиной ок. 30 мкм сделан с заливкой в парафин. Без парафина сделать срез не удавалось - в листе много липкого сока. Снято с объективом 40х/0,65. Мелкие включения в клетках - окрашенные хлоропласты, ИМХО.

Вложения:
Алоэ-3.jpg
Алоэ-3.jpg [ 79.36 КБ | Просмотров: 7623 ]

Автор:  guddini [ 01 сен 2014, 14:13 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Вот жеж красят люди....
http://zoom.ronaldschulte.nl/mu02/TemplateWebPage.htm

Автор:  guddini [ 28 сен 2014, 20:54 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

Надыбал фиолетовые чернила Радуга? Их можно как нибудь использовать в качестве красителя?

<iframe src="http://vk.com/video_ext.php?oid=70182580&id=168257721&hash=09389f61eb2b032c&hd=1" width="607" height="360" frameborder="0"></iframe>

Автор:  Rasalam [ 28 сен 2014, 21:09 ]
Заголовок сообщения:  Re: Подготовка препаратов: фиксация. окраска, заключение

guddini писал(а):
Надыбал фиолетовые чернила Радуга? Их можно как нибудь использовать в качестве красителя?

Где-то читал, что фиолетовые чернила - генцианвиолет, если да, то можно попробовать покрасить бактерии по Грамму.

Страница 18 из 47 Часовой пояс: UTC + 3 часа
Powered by phpBB® Forum Software © phpBB Group
https://www.phpbb.com/