Астрономия и микроскопия

Форум сайта "Два Стрельца"
Текущее время: 20 сен 2020, 16:16

Часовой пояс: UTC + 3 часа




Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 698 ]  На страницу Пред.  1 ... 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ... 47  След.
Автор Сообщение
СообщениеДобавлено: 24 янв 2014, 08:51 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Duke писал(а):
Советы такие - протащить выдержку до 0.
Съемку против света = 1
Четкость (резкость) - 1 до 2 (на ваших фото видны границы интерполяционных склеек между сегментами пикселей, уменьшение резкости их уберет)
Гамму снизить, не знаю - надо подбирать. Яркость и контрастность лучше всего в середине, если вебку засвечивает - надо свет уменьшать.

Спасибо, попробую.
Duke писал(а):
Что касается срезов в ручную - вы в парафин заливаете и приклееваете суперклеем (цианоакрилатом) к предметному стеклу, потом срезаете микротомным ножом или по-старинке советским лезвием бритвы? Цианоакрилат свет поляризует ,зараза, все в черно-белых разводах в скрещенных николях с эпоксидным не пробовали?

Нет, срезы не в парафине, режу свежий нефиксированный материал; обычно ручную резку рекомендуют делать в расщепленном стебле бузины, за неимением оной режу в топинамбуре, или в морковке, или в пробке; нож - опасная бритва. Есть самодельный "микротом" на базе микрометра (viewtopic.php?f=6&t=1603 , см. последний пост), цианоакрилатом были склеены две детали в этой конструкции (держатель обжимки и подшипник), к срезу этот клей касательства не имеет.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 24 янв 2014, 19:48 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Duke, я последовал Вашему совету. Вот фотоотчет.
Фото 1 снято с моими старыми настройками.
Фото 2 - с настройками, рекомендованными Вами. Действительно, лучше.
На фото фрагмент фиксированного среза сосновой иголки, окраска в смеси фуксина, хризоидина и толуидинового синего; объектив 20х/0,4; снимок "как есть", без обработки.


Вложения:
Комментарий к файлу: Фото 1.
Сосновая иголка 13.jpg
Сосновая иголка 13.jpg [ 217.2 КБ | Просмотров: 6621 ]
Комментарий к файлу: Фото 2.
Сосновая иголка 14.jpg
Сосновая иголка 14.jpg [ 190.96 КБ | Просмотров: 6621 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 24 янв 2014, 20:57 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 16 янв 2014, 16:39
Сообщения: 1970
Откуда: г. Санкт-Петербург
Вот еще хотел поделиться программой, улучшалкой разрешения фотоснимков http://smartdeblur.net/. С помощью нее можно углубить фокус изображения, кривизну поля уменьшить.
Там она платная, но версия smartdeblur 1.27 - фриваре.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 25 янв 2014, 01:51 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Duke писал(а):
Вот еще хотел поделиться программой, улучшалкой разрешения фотоснимков http://smartdeblur.net/. С помощью нее можно углубить фокус изображения, кривизну поля уменьшить.
Там она платная, но версия smartdeblur 1.27 - фриваре.

Спасибо. Скачал smartdeblur 1.27. Пробую. Но пока без особого успеха.

А вот еще такой любопытный объект. Поперечный срез листа нарцисса. Оказался для меня трудным - не могу подобрать окраску, каждый краситель красит его целиком, контрастной окраски разных тканей не получается. НО. В слое эпидермиса заметил устьица, в которых немного задержался хризоидин. Раньше видел их только "сверху" - в пленке эпидермиса, а тут вид сбоку. Фото 1 сделано с объективом 40х, фото 2 - 90х МИ. Оба фото со стекингом 8 кадров в PICOLAY.


Вложения:
Комментарий к файлу: Фото 1.
Нарцисс 06.jpg
Нарцисс 06.jpg [ 119.98 КБ | Просмотров: 6596 ]
Комментарий к файлу: Фото 2.
Нарцисс 07.jpg
Нарцисс 07.jpg [ 132.45 КБ | Просмотров: 6596 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 27 янв 2014, 21:12 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Сосновые иголки уже были...

Еще один кадр - окрашенный срез в темном поле (Фото 1).

А вот совершенно другой вид сосны, иголка имеет другую структуру, смоляные канальцы залегают гораздо дальше от поверхности листа; срез свежий нефиксированный (из отбраковки - толстый); забавно напоминает кошачью мородчку (Фото 2).


Вложения:
Комментарий к файлу: Фото 1
Сосновая иголка 18.jpg
Сосновая иголка 18.jpg [ 219.13 КБ | Просмотров: 6559 ]
Комментарий к файлу: Фото 2
Сосновоигольчатый  кот.jpg
Сосновоигольчатый кот.jpg [ 110.7 КБ | Просмотров: 6559 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 29 янв 2014, 22:00 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
А теперь окрашенный срез иголки новой сосны.

Фото 1. Объектив ПЛАН 9х. Любопытно, что эпидермис в основном прокрасился сафранином, а на уголках иголки - хризоидином.

Фото 2. Объектив 20х.

Оба фото со стекингом и последующей обработкой в SmartDeblur (последнее - по совету Duke).

Подготовка препарата:
1. Срез со свежей иголки.
2. Фиксация в ФАА примерно 30 мин. (до потери цвета хлоропластами).
3. Проводка через спирты 70%, 50%, 30% по 5 мин, помещение в дистиллированную воду.
4. Окраска 7 мин. в растворе фуксин 0,02% + сафранин 0,04% + хризоидин 0,04 % + уксусная к-та 2% в дист. воде.
5. Промывка в 2% уксусной к-те 5 мин.
6. Окраска 7 мин. в растворе анилиновый голубой водорастворимом 0,025% + уксусная к-та 2% в дист. воде.
7. Промывка в дист. воде.
8. Дифференцировка в глицерине - 2-3 часа (глицерин вымывает красители мягко, к тому же удобно контролировать насыщенность окраски, помещая время от времени срез под покровное стекло с глицерином).
9. Заключение в глицерин-желатину.


Вложения:
Комментарий к файлу: Фото 1.
Сосновая иголка 26.jpg
Сосновая иголка 26.jpg [ 77.75 КБ | Просмотров: 6511 ]
Комментарий к файлу: Фото 2.
Сосновая иголка 27.jpg
Сосновая иголка 27.jpg [ 163.28 КБ | Просмотров: 6511 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 29 янв 2014, 22:21 
Не в сети

Зарегистрирован: 03 сен 2012, 23:14
Сообщения: 1694
Фотки красивые. Всё лучше и лучше :)


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 02 фев 2014, 02:41 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
С осени в банке с морской водой у меня живет красная водоросль (багрянка). Решил порезать. Пока что нефиксированные срезы (срезы толстые, из отбраковки).
Фото 1 - срез в косом освещении, ПЛАН 9х. В большинстве хлоропластов преобладаюет красные пигменты фикобилины, хотя в центральной части есть хлоропласты с преобладанием зеленого хлорофилла.
Фото 2 - срез с того же стебля, окраска смесью толуидинового синего и метиленового синего, ПЛАН 9х.
Фото 3 - центральная часть среза крупным планом, 20х.


Вложения:
Комментарий к файлу: Фото 1.
Багрянка 03.jpg
Багрянка 03.jpg [ 162.25 КБ | Просмотров: 6424 ]
Комментарий к файлу: Фото 2.
Багрянка 02.jpg
Багрянка 02.jpg [ 95.43 КБ | Просмотров: 6424 ]
Комментарий к файлу: Фото 3.
Багрянка 01.jpg
Багрянка 01.jpg [ 111.89 КБ | Просмотров: 6424 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 02 фев 2014, 22:52 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 21 фев 2013, 21:43
Сообщения: 466
Откуда: Украина
Сэм-59, красивые фото )))
Подскажите, а в какой программе Вы делаете стекинг? в фотошопе?


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 03 фев 2014, 12:02 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Спасибо, Юрий.

Для стекинга я использую 2 программы: Helicon Focus 5.1 (требуется ключ регистрации) и PICOLAY (свободная программа, рекомендовал Актис, можно скачать с http://www.picolay.de). Эти фото обработаны в PICOLAY.
Фотошопом, к сожалению, не владею, все никак не соберусь освоить, хотя уже давно пора.

Еще пару слов за рекомендованную Duke программу SmartDeblur. Интересная штука: если размер пятна Эйри, создаваемого объективом в пространстве изображений, больше пикселя матрицы, то с ее помощью можно улучшить четкость изображения (убрать размытость); но нужно, конечно, подобрать правильные настройки. По идее, следовало бы обработать каждый снимок, участвующий в стекинге, отдельно, а затем выполнить стекинг. На практике у меня лучше получатся наоборот, т.е. сперва стекинг, а потом снижение размытия.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 17 фев 2014, 15:45 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Поперечные срезы листьев туи, по-видимому, Thúja occidentális.
Листья имеют чешуйчатую структуру.
На фото 1 - "чешуйки" примыкают к широкой стороне основного листа (или как это правильно назвать?).
На фото 2 - срез с того же образца, но здесь "чешуйки" примыкают к узкой стороне основного листа (слева внизу есть симметричная чешуйка, в кадр не помещается.
На фото 3 - центральная жилка (с проводящими каналами)
При изготовлении препаратов туи есть такое дело: срезы слипаются друг с другом, со срезами других растений, прилипают к кисточке; разлепить без повреждения не всегда удается.


Вложения:
Комментарий к файлу: Фото 1. Объектив ПЛАН 9х/0,2.
туя1.jpg
туя1.jpg [ 133.51 КБ | Просмотров: 6325 ]
Комментарий к файлу: Фото 2. Объектив ПЛАН 9х/0,2.
туя2.jpg
туя2.jpg [ 109.53 КБ | Просмотров: 6325 ]
Комментарий к файлу: Фото 3. Объектив 20х/0,4.
туя4.jpg
туя4.jpg [ 178.87 КБ | Просмотров: 6325 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 23 фев 2014, 00:02 
Не в сети

Зарегистрирован: 22 фев 2014, 15:53
Сообщения: 7
Подскажите пожалуйста где вы покупаете реактивы для фиксации и окраски ???


В аптеке можете приобрести препарат "Фукорцин", копейки стоит, в его состав входит основной фуксин, он тоже неплохо красит.

А метиленовый синий , спирты , эфир и.т.п. где ?


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 23 фев 2014, 12:20 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
рос26, в зависимости от Вашего географического положения могут быть разные варианты. Я на Украине, у нас метиленовый синий водный р-ор 1% и 96% этиловый спирт можно купить в аптеках; эфир купить нельзя - запрещен к продаже; фукорцин действительно содержит основной фуксин и фенол, он может заменить карболовый фуксин. Для фиксации формалином подойдет препарат Формидрон. Кристаллвиолет или метиловый фиолетовый содержится в фиолетовых чернилах "Радуга" для авторучек - пользовался, работает. Некоторые красители можно найти в пасхальных наборах для окраски яиц - см. ветку viewtopic.php?f=6&t=372.

Но если Вы живете в достаточно крупном городе, то можете найти фирмы, занимающиеся поставкой промышленной химии и лабораторных расходных материалов. "Открыв" такую возможность для себя, я перестал заморачиваться всякими аптеками и пр. - нашел такую фирму, которая продает даже по 1-2 грамма реактива и за очень гуманную цену. Но фирма, конечно, не продает запрещенных веществ без наличия соответствующей лицензии у покупателя.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 23 фев 2014, 13:07 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
рос26, вот пример окраски по Граму "из подручных средств".
Обнаружил на соленом огурце (давно лежал в холодильнике) колонию микроорганизмов.
1. Сделал отпечаток (мазок) на хорошо обезжиренном предметном стекле; стекла можно помыть в горячей воде с содой или хозяйственным мылом, затем обильно прополоскать проточной водой; лучше это делать в резиновых перчатках, чтобы тут же не испачкать их потожировыми выделениями с пальцев.
2. Сделанный отпечаток зафиксировал над газовой плитой: 3 раза провел над пламенем мазком вниз; стекло должно стать горячим, но рука должна "терпеть" его.
3. Положил на мазок квадратик из фильтровальной бумаги (промокашки, белой столовой салфетки) и накапал сверху фиолетовых чернил.
4. Через минуту убрал пинцетом бумагу, слил чернила и налил на мазок раствор Люголя (продается в аптеке; в отличие от канонического состава там есть еще глицерин, но он не мешает); тоже 1 минута.
5. Смыл со стекла остатки чернил и люголя проточной водой (пару секунд, без сильной струи; это не обязательно делать, но после такой промывки удобнее контролировать следующий этап)
6. Прополоскал мазок ок. 30 сек. в спирте - как только видите, что перестали отходить фиолетовые облачка красителя из мазка, - нужно вынимать из спирта.
7. Налил на мазок фукорцин, разведенный водой в отношении 1:3 (разводить надо непосредственно перед окраской, и совсем немного - оно не стойкое). Окраска минуту.
8. Ополоснул проточной водой, затем дистиллятом (дистиллят можно купить в рецептурной аптеке или в автомагазине), высушил мазок.
Смотреть с объективом 90х или 100х с масляной иммерсией.
Выглядит вот так:


Вложения:
Комментарий к файлу: Колония микроорганизмов
2014-02-23_0002_90X.jpg
2014-02-23_0002_90X.jpg [ 139.54 КБ | Просмотров: 6258 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 23 фев 2014, 13:27 
Не в сети

Зарегистрирован: 03 сен 2012, 23:14
Сообщения: 1694
Интересный эксперимент. Я окрашивал по Граму мазок слюны. Там много микроорганизмов. Причём как грамполож. так и грамотр. Фиксировать на открытом пламени лучше мазком вверх. Особенно занятно наблюдать когда в поле зрения микроскопа есть как фиолетовые так и красные микробы.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
Показать сообщения за:  Поле сортировки  
Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 698 ]  На страницу Пред.  1 ... 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ... 47  След.

Часовой пояс: UTC + 3 часа


Кто сейчас на конференции

Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и гости: 18


Вы не можете начинать темы
Вы не можете отвечать на сообщения
Вы не можете редактировать свои сообщения
Вы не можете удалять свои сообщения
Вы не можете добавлять вложения

Найти:
Перейти:  
Создано на основе phpBB® Forum Software © phpBB Group
Русская поддержка phpBB
Яндекс.Метрика